Исследователи придумали новый метод вырезания и вклейки, исправляющий крошечные ошибки в гене, делающем решающий фермент печени у крыс. Результаты, представленные на этой неделе на годовом собрании американской Ассоциации для Исследования Заболеваний печени в Чикаго, могут возвестить новую породу генотерапии, которая могла потенциально вылечить болезни, такие как гемофилия и анемия серповидного эритроцита, вызывающиеся мутациями в единственной основе нуклеотида.
Традиционные формы генотерапии полагались на модифицированные вирусы для перевозок с кругооборотом транспорта всех последовательностей корректирующих генов в камеры пациентов – трудная задача. Обманывать клетки в фиксацию их собственных генов, исследователей – hepatologist и биолог клетки Клиффорд Стир и биохимик Бетси Крен из Миннесотского университета, Миннеаполис и их коллеги – превращенный к искусственным частям формы гантели ДНК и РНК, названной фантастическими олигонуклеотидами.
Эти части искренне соответствуют генетической последовательности видоизмененного гена за исключением исправленной версии неправильного нуклеотида. Следователи обошли вирусный шаттл путем связывания олигонуклеотидов в пальто подобных нефти молекул или прикрепления их на полимеры, разработанные для закрепления с определенными клетками печени.Бригада проверила измененные олигонуклеотиды у крыс, несущих дефект единственного нуклеотида в существенном гене печени, известном как UDP-glucuronosyltransferase-1. Люди с дефектным геном сокрушены с болезнью Криглер-Наджара, смертельной болезнью, при которой пациенты не могут сломаться или выделить билирубин и закончить сильно озлобленные.
После пяти ежедневных инъекций олигонуклеотидов в вены хвоста 20 крыс все преобразовали до 25% их дефектных генов печени к нормальным версиям. (Большинство экспериментов генотерапии считает 1% к 2%-му обменному курсу успехом.) «Это – как будто клетки никогда не знали, что у них была последовательность мутанта», говорит Бык, ведущий следователь. Уровни билирубина зашли больше, чем половина и оставались там в течение 6 месяцев до сих пор.
«Это точно, чего я ждал», говорит Майкл Блэезе, который так очарован методом, что он покидает свой пост как руководитель клинического отделения генотерапии в Национальном Научно-исследовательском институте Генома человека в Молитвенном доме, Мэриленд, для работы на компанию, производящую новые олигонуклеотиды РНК/ДНК. «Потенциал, если реальный, невероятен», говорит Марио Капекки, давний исследователь генотерапии в университете Юты, Солт-Лейк-Сити. «Но я был бы намного более взволнован, если другие в состоянии воспроизвести [открытие]».