В экспериментах на крысах, свиньях и обезьянах исследователи Johns Hopkins Medicine разработали способ доставки генной терапии, спасающей зрение, на сетчатку. Если окажется, что этот метод безопасен и эффективен для людей, он может предоставить новый, более постоянный терапевтический вариант для пациентов с распространенными заболеваниями, такими как влажная возрастная дегенерация желтого пятна (AMD), и потенциально может заменить дефектные гены у пациентов с наследственным заболеванием сетчатки.
Новый подход, описанный в августовском. В 13 выпуске журнала клинических исследований используется небольшая игла для введения безвредных, генно-инженерных вирусов в пространство между белком глаза и сосудистым слоем глаза, называемое супрахориоидальным пространством. Оттуда вирус может распространяться по глазу и доставлять терапевтические гены в клетки сетчатки.
Подход генной терапии, который в настоящее время используется для лечения врожденного амавроза Лебера, наследственного заболевания глаз, включает в себя хирургическую процедуру введения вируса, несущего ген, под сетчатку. Эта процедура сопряжена с высоким риском развития катаракты у пациентов и низким, но значительным риском отслоения сетчатки и других угрожающих зрению осложнений.
Несмотря на то, что до этого момента новые супрахориоидальные инъекции тестировались только на животных, они менее инвазивны, поскольку не предполагают отслоения сетчатки, и теоретически это можно делать в амбулаторных условиях, что является важным шагом на пути к созданию постоянного гена, сохраняющего зрение. терапии безопаснее и доступнее.
"Лучшее время для пациентов с наследственной дегенерацией сетчатки для лечения генной терапией – это когда у них еще достаточно хорошее зрение. Однако в то время им также есть что терять от осложнений. Возможность предложить более безопасную и удобную процедуру была бы прорывом," говорит Питер Кампокьяро, M.D., Экклс, профессор офтальмологии и неврологии в Медицинской школе Университета Джона Хопкинса и Глазном институте Уилмера.
Подход генной терапии с субретинальной инъекцией также проходит испытания в клинических испытаниях по поводу возрастной дегенерации желтого пятна, которая является одной из основных причин необратимой потери зрения у людей старше 50 лет, по данным Национального института глаз. Около 10 миллионов американцев страдают возрастной дегенерацией желтого пятна. В болезни чаще встречается "влажный" формы, аномальные кровеносные сосуды растут под сетчаткой и пропускают жидкости, блокирующие зрение, в глаз. Рост и утечка аномальных кровеносных сосудов вызваны избыточным производством клеточного сигнала, называемого фактором роста эндотелия сосудов (VEGF).
В настоящее время офтальмологи могут предотвратить потерю зрения, вводя в глаз белок, блокирующий VEGF, но эти методы лечения имеют ограниченный срок жизни, поэтому пациенты должны возвращаться в клинику каждые четыре-шесть недель для дополнительных инъекций для поддержания своего зрения. Пропущенные встречи могут привести к росту аномальных кровеносных сосудов, что приведет к дальнейшей потере зрения.
"Мы обнаружили, что повторное лечение, хотя и эффективно, может быть трудным для пациентов, и со временем они теряют зрение," говорит Кампокьяро.
Однако генная терапия может превратить каждую клетку сетчатки в небольшую фармацевтическую фабрику, которая постоянно производит белки против VEGF, тем самым непрерывно поддерживая зрение без повторных инъекций.
Чтобы проверить, может ли метод супрахориоидальной инъекции эффективно доставлять генную терапию на сетчатку, исследователи сначала хотели отследить, позволит ли методика вирусу достичь задней части глаза. Исследователи ввели в глаза 10 крысам безвредную форму аденоассоциированного вируса, модифицированную для переноса флуоресцентного маркера в супрахориоидальное пространство глаза. Они использовали мощные микроскопы для отслеживания свечения сетчатки и обнаружили, что через неделю вирус достиг всей сетчатки.
Затем исследователи посмотрели, может ли этот вирус доставлять полезные гены. Они загрузили ген анти-VEGF в свой модифицированный вирус и ввели его в супрахориоидальное пространство у 40 крыс, у которых развилась человекоподобная форма дегенерации желтого пятна. Для сравнения они использовали обычную субретинальную инъекцию у 40 других крыс.
Исследователи обнаружили, что метод супрахориоидальной инъекции работает так же хорошо, как и традиционный субретинальный доступ, и был столь же эффективным и длительным в доставке защищающего зрение белка анти-VEGF. Также проведя эти эксперименты на свиньях и макаках-резусах, исследователи подтвердили, что супрахориоидальный метод доставки работает в глазах более крупных животных, которые по размеру ближе к человеческим. Все дали аналогичные результаты.
Хотя эта генная терапия является многообещающей, Кампокиаро отмечает, что она может не подходить для людей, ранее подвергавшихся воздействию вирусов, подобных тому, который они использовали в этих экспериментах, потому что их иммунная система может остановить вирус, прежде чем он сможет доставить свой груз в клетки сетчатки. Однако он считает, что супрахориоидальные инъекции однажды могут оказаться жизнеспособным вариантом для большого числа пациентов с влажной AMD и пациентов с наследственными заболеваниями, вызванными дефектными генами.
"Мы надеемся, что с супрахориоидальными инъекциями пациенты могут просто пойти в клинику и получить лечение, спасающее зрение, не беспокоясь о многих осложнениях, которые возникают при субретинальных инъекциях," говорит Кампокьяро.